自动取样溶出系统测定头孢呋辛酯片溶出曲线与数据库对比

2022-11-17

随着《国家药品安全“十二五”规划》的出台, 对全面提高药品安全指数, 降低药品安全风险做出了更高的要求, 仿制药质量一致性评价工作迫在眉睫。为此, 国家食品药品监督管理局决定, 对2007年修订的《药品注册管理办法》实施前批准的基本药物和临床常用仿制药, 分期分批进行质量一致性评价。进行仿制药的一致性评价是持续提高药品质量的有效手段, 对提升制药行业整体水平, 保障公众用药安全具有重要意义[1]。

其中口服制剂首先选作药品评价的先行军。溶出曲线的检测是目前模拟口服固定制剂在胃肠道中崩解和溶出的体外试验很有效的方法[2]。国家首批进行仿制药一致性评价的药品和企业名单已经初步确定, 共涉及15个药品品种及20家企业, 在2015年前要求企业生产的仿制药达到与被仿制药的“一致性”, 未通过质量一致性评价的不予再注册, 并将注销其药品批准证明文件。第一批一致性评价仿制药包括头孢呋辛酯片 (250mg) , 本次试验以原研制剂头孢呋辛酯片 (250mg) 为例, 测定溶出曲线与中国食品药品检定研究院数据库 (以下简称“数据库”) 进行对比, 进一步验证药物自动取样溶出试验仪精确性和理论偏差。

一、试验仪器与试药试剂

1. 仪器ADFC12AD溶出取样收集系统 (天大天发公司) ;紫外可见分光光度仪UV2550 (岛津公司) , 吸收池:1cm;ME54E电子天平 (梅特勒公司) 。

2. 试验药品和试剂头孢呋辛酯对照品 (批号:130492-200402, 中国药品生物制品检定所) ;头孢呋辛酯片 (C554095, 葛兰素史克) ;盐酸, 氢氧化钠, 磷酸二氢钾, 冰醋酸和醋酸钠为分析纯;水为自制去离子水。

二、方法与操作

1. 溶出曲线测定方法:

取本品, 照溶出度测定法 (中国药典2010年版二部附录XC第二法) , 分别以规定的四种溶剂900ml为溶出介质, 转速为每分钟55转, 依法操作, 在5、10、15、20、30、45、60分钟时, 取溶液适量 (5~10ml) , 过滤, 并及时补充相同温度相同体积的溶出介质, 取续滤液适量, 分别用溶出介质定量稀释制成每1ml中约含15μg的溶液, 作为供试品溶液;另精密称取头孢呋辛酯对照品适量, 加甲醇适量 (每5mg头孢呋辛酯加甲醇1ml) 溶解, 用相应的溶出介质定量稀释制成每1ml中约含15μg的溶液, 作为对照品溶液。照紫外-可见分光光度法 (中国药典2010年版二部附录IVA) , 在278nm的波长处分别测定吸光度, 计算每片在不同时间点的溶出量。以12片的平均溶出量为纵坐标, 时间为横坐标, 绘制溶出曲线。

2. 溶出介质的制备

(1) 四种溶出介质的配制方法:

(1) p H1.2盐酸溶液:取盐酸7.65ml, 用水稀释至1000ml, 摇匀, 即得。

(2) p H4.0醋酸盐缓冲液:取醋酸钠1.22g, 2mol/L醋酸溶液[取冰醋酸120.0g (114ml) , 用水稀释至1000ml]20.5ml, 加水溶解并稀释至1000ml, 摇匀, 即得。

(3) p H6.8磷酸盐缓冲液:取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液 (取磷酸二氢钾27.22g, 加水溶解并稀释至1000ml) 250ml, 0.2mol/L氢氧化钠溶液 (取氢氧化钠8.00g, 加水溶解并稀释至1000ml) 112.0ml, 混合后, 用水稀释至1000ml, 摇匀, 即得[3]。

(4) 水:纯化水。

(2) 对照液的配置

精密称定头孢呋辛酯对照品约18.0mg于100ml量瓶中, 加乙醇约5ml使溶解, 加溶出介质溶解并稀释至刻度摇匀, 精密量取5ml于50ml量瓶中加溶出介质稀释至刻度, 摇匀[4]。

3. 溶出曲线测定

参照测定方法分别按上述四种介质测定12条片剂平均值溶出曲线:

三、数据分析

1. 溶出曲线相似性对比与判定方法

溶出曲线相似性的比较是将试验所测的平均溶出量与数据库的平均溶出量进行比较。平均溶出量应为12片 (粒) 的均值。采用相似因子 (f2) 法比较溶出曲线相似性:当参比制剂15分钟溶出量达85%以上时仿制制剂15分钟平均溶出率也应达85%以上, 且12片中仅能有1片小于85%;此时无需采用f2因子比较, 也无需关注5、10、20、30分钟溶出量, 但需测定。

当参比制剂在15~30分钟内溶出量达85%以上时采用f2因子比较, 比较5或10、15、30分钟3个时间点。 (根据溶出量等分原则选择5或10min时间点) 。

当原研制剂在30分钟后达85%以上时采用f2因子比较, 采用四个时间点的平均溶出量。

相似因子f2=50×lg[ (1+Q/n) -0.5×100]。如果50≤f2≤100, 则表示两个制剂的溶出曲线相似[5]。

2. 计算相似度

由上图可知, 参照数据库中的检测方法进行试验和计算得出, 数据库头孢呋辛酯片曲线15分钟溶出量达85%以上, 该批次试验制剂15分钟平均溶出率也应达85%以上, 符合平均片偏差要求, 结论:此时直接判定相似[6], 并且从图6和图7相比较, 很明显判断出四种介质对应溶出曲线是极其相似的, 这就说明从理论上自动溶出仪是检测口服固体制剂溶出曲线的很有效、快捷和经济的药物试验仪器。

四、讨论

由于口服制剂一致性评价工作无法进行BE试验, 所以只有进行多条有效的溶出曲线比对研究, 才能最大程度地促使两者体内生物利用度一致, 首要前提是需要精确并通过3Q验证的溶出检测仪器[7]。仪器的发展水平从一定程度上可以反映出质量一致性评价工作的准确性和精确性, 所以我们还需要亟待物美价廉的先进仪器。

摘要：药品疗效的优劣 (即药物体内吸收的程度) , 主要是与生物利用度紧密相关的。口服制剂溶出曲线的检测是一种模拟口服固定制剂在胃肠道中崩解和溶出的体外试验方法, 体现了药物在体内的吸收程度。以头孢呋辛酯片 (250mg) 为实验实例, 本实验依照中国药典2010年版二部附录XC第二法, 用国产自动取样溶出系统测定溶出曲线同中国食品药品检定研究院数据库相应曲线进行对比, 进行一致性评价, 判定自动溶出仪精确性。

关键词：头孢呋辛酯片,溶出曲线,自动取样,一致性评价