单克隆抗体的动物免疫

第一篇：单克隆抗体的动物免疫

动物细胞融合与单克隆抗体 教学设计

《动物细胞融合与单克隆抗体》教学设计思路

一、 教材

《动物细胞融合与单克隆抗体》是人教版高中生物选修3专题2第2节第2部分内容。单抗的制备是动物细胞工程中一个重点，也是一个难点，在高考中也经常出现。同时它也是一个学科内的综合内容，综合了免疫及动物细胞工程的相关知识。

二、 学情

本节课之前学生已经学习了植物体细胞杂交的有关内容，动物细胞融合与植物原生质体融合比较相似，有利于新内容的学习。本节内容是一个典型的学科内综合，综合了细胞培养、免疫、等知识点，但很多同学难以将这些内容联系起来，以及难以将制备过程中的筛选准确理解。

三、教学目标、重难点

根据课程标准、教材内容，学生的实际情况，我确定了以下的教学目标： 知识目标

⑴ 掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。 ⑵ 简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。 ⑶ 了解单克隆抗体在实践中的应用。 能力目标

让学生掌握获取知识和探索生物科学的基本方法，使学生了解生物科学认识模式以发展学生的创造性能力。 情感目标

介绍动物细胞融合与单克隆抗体技术的发展及一些新的研究成果，使学生明确人们对生命奥秘的揭示愈加广泛和深入，知识不断更新并向前发展，认识到学无止境，形成终生学习的意识。

单克隆抗体是动物细胞工程的新技术，其制备过程尤其是两次筛选过程不太容易理解。因此，本节课的教学重点、难点就是单克隆抗体的制备过程。

四、教法、学法

动物细胞融合这一部分内容比较简单，学生已有植物原生质体融合过程作为基础，针对这一部分采用对比归纳法教学。而单克隆抗体这一部分内容较难，采用设问诱导法教学，引用两位科学家对单克隆抗体的研究过程，会起到较好的效果。

学生主要采用对比、自学、讨论相结合的方法，进行本节课的学习。

五、教学过程

为了能让学生动起来，能让课堂活起来，从而达到更好学习效果，我设计了如下教学环节： 【环节一】复习导入，联系已知：

引导学生复习回顾上节课所学植物体细胞杂交技术的基本知识，提出思考问题：动物细胞能像植物原生质体那样融合吗?出示必修1人----鼠细胞融合图片(PPT),此实验说明动物细胞也是可以融合的。那么，如何实现动物细胞的融合，以及动物细胞融合后有何用途呢?这就是今天这节课我们要学习的内容。这样就很自然地引入新课------《动物细胞融合与单克隆抗体》。这样设计回顾已知，提出新知，激发学生学习兴趣。

【环节二】对比归纳，知识迁移：

让学生阅读第52页动物细胞融合的有关内容，回答以下3个问题:⑴动物细胞融合的概念;⑵动物细胞融合的结果;⑶动物细胞融合的意义。

让学生回答以上问题，并引导学生推测出动物细胞融合与植物原生质体融合(已学)的原理和方法基本相同，特别指出动物细胞融合特有的诱导因素是灭活的病毒(生物技术资料卡P52)。然后出示植物细胞杂交和动物细胞融合比较表(PPT)，让学生将表补充完整。这样联系旧知识，提供一个比较的对象，以培养学生的知识迁移能力，并通过对融合过程示意图的描述(PPT)进一步加深对知识的理解和记忆。

技术的产生不是凭空产生的，了解发展史(P52)，体验科学技术是不断发展的过程。最后指出动物细胞融合技术有一个十分重要的用途，就是制备单克隆抗体，从而自然过渡到单克隆抗体的教学上。

【环节三】层层设问，步步深入：

通过设计问题串来诱导学生自学、讨论、总结，以激发学生的求知欲。针对重要内容设置问题，让学生带着问题读书，通过阅读课文，解决问题。可以使学生快速熟悉课文，提高教与学的效率，也能锻炼学生的自主学习能力。

让学生预习第52页最后一段话并回忆所学免疫内容，回答下面问题： ⑴产生细胞：__________________

⑵成分：__________。

1 ⑶特点：从__________中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。

引导学生分析传统的抗体制备方法(ppt)，找出弊端，然后分析探索新的方法克服弊端，再引导学生分析新方法面临的问题，从而引出解决方案。

参考米尔斯坦和科勒极富创造性的设想，应该怎样设计?让学生明确单克隆抗体制备的设计思路。完成学案关于过程的图解和特点、优点。然后让学生带着以下问题体会单克隆抗体制备过程：

1、如何获得B淋巴细胞?

2、如果把B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起时，会有几种融合方式(类型)?

3、 选择杂交瘤细胞进行几次筛选?每次筛选的目是什么?

4、此过程运用哪些技术手段?

这样提出问题，诱导思考，步步深入地了解单克隆抗体的生产过程(动画)。最后让学生口述此过程，以加深对本节课重、难点的理解和记忆。

拓展资料“杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养介绍”了解先进的技术发展。

单克隆抗体应用的教学主要以学生自学为主，明确单克隆抗体的优点和应用及“生物导弹”的组成及特点(ppt)。 【环节四】课堂小结，构建框架(ppt)，明确本节课的学习内容：课后反思 【环节五】例题、随堂练习及作业(选题原则ppt)，及时反馈

根据这节课的教学重难点设置了课堂检测。它不仅是学生对所学知识的检测，也是教师掌握学情和检测教学效果的手段，更是课堂高效性的一种体现。

第二篇：重大动物疫病免疫抗体监测情况的通报

各乡镇重大动物疫病防制指挥部：

为贯彻落实省、市秋季重大动物疫病防控工作会议部署，我县领导对此高度重视，县重大动物疫情防治指挥部于11月上旬开始对全县各乡(镇)进行秋防督查。本次督查按照《重大动物疫病防控工作绩效考评的通知》、《重大动物疫病防控目标管理考核方案》进行督查评分，作为年终考评依据。现将有关事项通报如下：

一、高致病性禽流感免疫效果监测情况

本次由各乡镇畜牧兽医站负责血清学样品采集高致病性禽流感样品***份，合格为***份，合格率为***%，其中

************抗体合格率均未能/能达到农业部70%合格率的要求。

二、鸡新城疫免疫效果监测情况

本次由各乡镇畜牧兽医站负责血清学样品采集鸡新城疫样品***份，合格为***份，合格率为***%，其中*********均能达到农业部70%合格率的要求;******抗体合格率均未能达到农业部70%合格率的要求。

三、猪瘟免疫效果监测情况

本次由各乡镇畜牧兽医站负责血清学样品采集猪瘟样品***份，合格为***份，合格率为***%，其中***未能达到农业部70%合格率的要求。

四、口蹄疫免疫效果监测情况

本次由各乡镇畜牧兽医站负责血清学样品采集口蹄疫样品***份，合格为***份，合格率为***%;其中猪口蹄疫样品***份，合格为***份，合格率为***%，其中*********未能达到农业部70%合格率的要求;牛羊口蹄疫样品***份，合格为***份，合格率为***%，其中*********牛羊口蹄疫抗体合格率均未能达到农业部70%合格率的要求。

五、蓝耳病免疫效果监测情况

本次由各乡镇畜牧兽医站负责血清学样品采集猪蓝耳病疫样品***份，合格为***份，合格率为***%，其中***************抗体合格率均未能达到农业部70%合格率的要求。

六、布鲁氏菌病抽样监测情况

我县布鲁氏菌病今年未发生疑似病例。本次流调由各乡镇从***个场(户)中抽取血清样品***份，其中奶牛***份，肉牛***份，羊***份，猪***份;经县兽医实验室监测，该批血清全部呈阴性。

七、主要存在的问题

1、据了解，部分散养户因新进一批家禽，采样情况不明，疫苗注射量没有达到标准;某些技术员刚刚调换，疫苗在运输过程中保管不到位，注射疫苗的部位不准确才导致免疫抗体水平相对较低。

2、部分乡镇免疫档案仍存在缺漏，亟待完善。

3、部分乡镇防疫经费没有到位。

四、下一步工作要求

1、继续加强对村级动物防疫员的培训力度，提高基层防疫员的技术水平，选拔责任心强的人员参加动物防疫队伍。

2、抗体合格率未能达到农业部要求的乡镇必须进行强化免疫和补免工作。

3、各乡镇要继续加强对主要动物疫病病原学监控，特别是对中、小规模饲养场、活禽市场和屠宰场等关键场所的监控，扩大监测面，增加监测频次;发现阳性病例，按规定及时规范处置。

4、各乡镇应贯彻上级的防控方针，保持畜禽抗体水平在70%以上，确保畜禽免疫密度保持动态100%要求，同时要进一步夯实基础，强化责任、创新机制，以更加务实的作风抓紧抓实各项措施的落实，以便于在今后的工作中取长补短，提高工作效率。

第三篇：关于开展主要动物疫病免疫抗体监测盒病原学监测工作的

关于开展主要动物疫病免疫抗体监测和

病原学监测工作的通知

各乡(镇)畜牧兽医站：

根据2014年“全国春季重大动物疫病防控工作视频会议”和“甘肃省春季重大动物疫病防控工作视频会议”精神，为了彻底搞好我县主要动物疫病免疫抗体监测和病原学监测工作，全面完成陇南市畜牧兽医局下达我县的各项样品采集任务，先将有关事宜通知如下：

一、正确认识当前形势，提高觉悟，增强搞好主要动物疫病集中监测的责任感

当前国内外动物疫情形势仍然十分严峻，主要动物疫病免疫抗体监测和病原学监测工作，已经成为重大动物疫病防控工作的重要环节，各乡(镇)畜牧兽医站一定要认识到动物疫病免疫抗体监测和病原学监测工作的重要性，增强责任感，以饱满的热情投入到防疫过程疫病监测工作中去。

二、加强组织领导，认真安排部署，严格采样操作，按时完成任务

主要动物疫病免疫抗体监测和病原学监测工作，采样种类多，操作要求严，工作任务大。血清样品：每份禽血清应在0.5毫升以上，需采全血3毫升以上;每份畜血清应在1毫升以上，需采全血5毫升以上。病原学监测：高致病性蓝

耳病、猪瘟样品应采集流产死胎及以高热为特征的死亡病例组织病料(淋巴结、扁桃体、肾、脾);所采病料应严防污染、单独保存。各乡(镇)畜牧兽医站一定要加强组织领导，认真安排部署，严格采样操作，按时完成各项采样任务，并与4月25日前将样品送到县动物疫病预防控制中心。

三、建立健全长效机制，切实保障防疫质量

主要动物疫病免疫抗体监测和病原学监测工作，作为动物防疫工作的重要环节已纳入各乡(镇)兽医站年终工作考核指标之列，并建立长效机制。各乡(镇)兽医站一定要认真对待、扎实工作，切实保障我县防疫质量更上一层新台阶。

附：成县2014年春季动物疫病抗体监测任务分配表

二0一四年三月十一日

第四篇：单克隆抗体的制备及特点

单克隆抗体

一、单克性抗体的制备

1、免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生效应B淋巴细胞的过程。

2、将准备好的骨髓瘤细胞与效应B淋巴细胞按一定比例混合，并加入促融合剂聚乙二醇或灭活的病毒。在聚乙二醇或灭活的病毒作用下，各种效应B淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合，形成杂交瘤细胞。

3、选择性培养 选择性培养的目的是筛杂交瘤细胞。在选择性培养基上未融合的骨髓瘤细胞、未融合的淋巴细胞，但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。 只有融合的杂交瘤细胞才能在选择性培养基存活，杂交瘤细胞既能无限增殖，又能分泌特异性抗体

4、杂交瘤细胞的克隆化培养和抗体阳性检测。选择性培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此，必须进行筛选和克隆化，筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞。

5、单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内培养法和体外培养法。

(1)体内培养法;用注射器抽取腹水，从中可获得大量单克隆抗体。 (2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。从培养液中获取所需要的单克隆抗体。

二、单克性抗体的特点

特异性强、灵敏度高、能大量制备

三、杂交瘤细胞的特点

杂交瘤细胞既能无限增殖，又能分泌特异性抗体

四、单克隆抗体制备过程中有三个筛选过程

1、从脾脏中筛选出多种效应B细胞。

2、在特定的培养基中筛选杂交瘤细胞

3、进行克隆化培养和抗体阳性检测，筛选出能产生特定抗体并能无限增殖的杂交瘤细胞。

五、单克隆抗体应用的基本原理是：抗原——抗体的的特异性结合。

六、单克隆抗体的主要应用

1、作为诊断试剂：单克隆抗体最广泛的应用就是作为诊断试剂。由于单克隆抗体纯度高、特异强，能准确地识别抗原物质的细微差别，并能与一定抗原特异性结合。

2、用于治疗疾病和运载药物。把抗癌细胞的单克隆抗体放射性同位素、化学药物或细胞毒素结合制成生物导弹。利用抗原——抗体的的特异性结合，借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带到癌细胞所在部位，在原位杀死癌细胞，不损伤正常细胞、药剂量少、疗效高、毒副作用小。

第五篇：单克隆抗体在肿瘤治疗中的应用

【摘要】单克隆抗体在一段相当短的时间内成为治疗癌症的主流方法。它们的第一个用途是作为致癌受体酪氨酸激酶受体拮抗剂，但今天单克隆抗体已成为长期寻求的有效化疗药物靶向递送的载体并作为操纵抗癌免疫反应的功能的强大的工具。在临床上有更加可喜的成果，未来将有可能看到持续增长治疗性抗体和它们的衍生物的发展。

由于单克隆抗体药物专一性强、疗效显著，为抗肿瘤治疗开辟了一条新的途径，因此成为近年来研究的热点药物之一。单克隆抗体抗体是由B 淋巴细胞转化而来的浆细胞分泌的，每个B淋巴细胞株只能产生一种它专有的、针对一种特异性抗原决定簇的抗体。这种从一株单一细胞系产生的抗体就叫单克隆抗体，简称单抗。这些抗体具有相同的结构和特性。抗体与特异性表达的肿瘤细胞表面蛋白质结合，从而阻碍蛋白质的表达，起到抗肿瘤作用。抗体还可使B 淋巴细胞产生免疫反应，诱导癌细胞凋亡。早期单抗为鼠源性单抗，易被人体免疫系统识别，应用受到限制。后来采用基因工程的方法生产人源或人鼠嵌合型单抗，广泛应用于临床。

单抗药物治疗主要是利用其靶向性来干预肿瘤发生发展过程中的各个通路，或是激活宿主对肿瘤的免疫等。随着生物医学的不断发展，一定会出现具有更高靶向性的单抗药物。但是，单抗药物还存在一些尚未解决的问题，最突出的问题是如何降低单抗的免疫原性，单抗的异源性所引起的抗体反应，不但降低了单抗的效价，而且会给患者带来严重的后果。因此，对异源性单抗进行改造以及人源性单抗的研制成为单抗研究的重要方向 1.EGEG疗法

表皮生长因子受体EGFR是一种细胞表面蛋白，与多种癌症密切相关，也是癌症治疗的主要靶标。基因编码信息被翻译为特定蛋白，不过，许多蛋白必须经由翻译后程序激活，比如自身磷酸化。蛋白激活影响着许多重要的细胞过程，包括细胞增殖、分化和迁移。若EGFR出现故障使这些过程脱离控制，就会导致癌症。然而，尽管EGFR与癌症有着密切关联，人们对EGFR的激活机制还并不完全了解。

受体酪氨酸激酶是一个细胞表面受体大家族，EGFR也是其中一员。EGFR有一个细胞外的配体结合域，和一个细胞内的激酶区域 。EGFR激活是其配体EGF结合到配体结合域，诱导受体二聚化，随后二聚体的两个激酶区域相互磷酸化。因为在相对较低的浓度下，即使没有EGF诱导的二聚化，单独的激酶域在溶液中也能自激活。二聚化是指两个同样的分子聚合形成单个化合物。研究发现，除了配体EGF结合以外，EGFR激活还需要EGFR跨膜螺旋和细胞膜附近区域发生结构偶联。正是这种结构偶联，允许配体存在时EGFR发生二聚化。 2.HER2疗法

癌症免疫疗法又称为生物疗法，主要是利用某些免疫机制对抗癌症疾病，这种治疗方法大约可以分为三个方面，其一是单克隆抗体，第二是癌症疫苗及其它主动免疫治疗，最后是非专一性免疫治疗和其它佐剂。其中抗体，一度曾被称为是癌症治疗的“神奇子弹”，多年前就已经有临床数据显示单抗药物对于肿瘤治疗效果显著。

抗原与细胞表面受体结合，引发免疫系统生成对应的抗体，从而靶向和杀死细胞，因此靶向癌细胞中某个受体的抗体药物，能靶向杀死癌细胞，同时激活免疫应答。癌症免疫疗法采用的单克隆抗体(mAb)是一种人造抗体，通过设计可以结合到某个特异性癌症抗原上，目前癌症领域已经有11种单克隆抗体得到了批准，大部分都是过去十年间获批的。使用最广泛的就是用于治疗HER2阳性乳腺癌的曲妥珠单抗 (Herceptin)，以及用于治疗某些特殊淋巴瘤和白血病的利妥昔单抗 (Rituxan)。

其中曲妥珠单抗 (Herceptin)是第一个也是唯一一个被批准用于治疗转移性乳腺癌和早期乳腺癌的人表皮生长因子受体2(HER2)单克隆抗体，被广泛应用于各期HER2阳性乳腺癌的治疗。这种重组DNA衍生的人源化单克隆抗体能选择性地作用于人表皮生长因子受体-2(HER2)的细胞外部位。而利妥昔单抗 (Rituxan)则是针对非何杰金氏淋巴瘤的抗体药物，淋巴瘤大体上可分为何杰金氏病和非何杰金氏淋巴瘤，非何杰金氏淋巴瘤在所有癌症的发病率及死亡率中，高居第五位，而且在过去二十年，它的盛行率不断地增加。利妥昔单抗是美国第一个被允许用来治疗癌症的单株抗体，它可以强化病人的免疫机能，来锁定及摧毁癌细胞。

3.新型抗体技术 3.1双特异性抗体

目前已经采用了越来越先进的抗体工程技术，研制更有效的治疗方法，比如有研究组就发现了一种称为双特异性抗体(bispecific antibodies，bsAbs)，这种抗体能结合两个不同的肿瘤抗原，或者一个肿瘤抗原和肿瘤微环境中的另外一个靶标上，譬如免疫系统杀伤细胞。这种具有双特异性的抗体杂合子在功能上是单价的，化学结构上是双价的，优于传统的单克隆抗体。

目前FDA批准上市的首个双特异性抗体药物是Blinatumomab，Blinatumomab是BiTE(双特异性T细胞衔接器，bispecific T-cell engager)抗体药物，同时针对肿瘤细胞表面的CD19抗原和T细胞表面的CD13抗原。用于治疗费城染色体阴性(Ph-)复发性/难治性前体B细胞急性淋巴细胞白血病。此外，Blinatumomab也由此成为了世界上第一种获得FDA批准的CD19药物。 3.2抗体偶合药物

另外还有一种单克隆抗体，能携带一种对癌细胞有毒的载体，比如放射性核素，其它药物，毒素，或者酶。还有研究还提高了抗体的容量，使之能被细胞吸收，从而结合在细胞内的抗原上，而不仅仅是细胞表面的抗原。 3.2.1放射免疫偶联物

放射免疫治疗(RIT)是以单克隆抗体为载体 ,以放射性核素为弹头 ,通过抗体特异性结合肿瘤细胞相关抗原 ,将产生高能射线的放射性核素靶向到肿瘤细胞 ,实现对肿瘤的近距离内照射治疗。RIT利用携带放射性核素的单克隆抗体特异地结合到病灶部位 ,减少了对正常组织的损伤。90Y— ibri2tumomab是第1个被 FDA批准应用于临床的放射免疫制剂 ,主要用于复发的淋巴瘤患者或对单独应用利妥昔单抗疗效不佳的患者。 3. 2。2免疫毒素

免疫毒素是用化学方法或基因工程方法将肿瘤选择性单抗与经修饰的多肽毒素共价连接而成的肿瘤治疗药物。免疫毒素可与肿瘤细胞表面受体或与细胞表面的靶抗原相结合后内化 ,继而在胞内抑制细胞蛋白质合成 ,导致肿瘤细胞死亡。毒素有很多种 ,如植物毒素、 细菌毒素、 动物毒素 , 其中引用最广泛的是植物毒素中的白喉毒素。美国 FDA已经批准了白喉毒素与白细胞介素 2 重组的免疫毒素 ONTAK(DAB3892I L2) ,用于治疗人皮肤 T细胞淋巴瘤[13214 ]。 3. 2.3化学免疫偶联物

单抗是药物良好的靶向性载体 ,通过药物分子上特殊的功能基团如:羟基、 巯基、 氨基等 ,将治疗药物与单抗相连接而组成化学免疫偶联物 ,避免了药物对其他正常组织的毒害作用,选择性地发挥治疗作用。常与单抗进行偶联的药物有阿霉素、 柔红霉素、 平阳霉素、 博安霉素、 丝裂霉素、 新制癌菌素、 氨甲喋呤等。