繁殖管理论文范文

2022-05-09

下面是小编为大家整理的《繁殖管理论文范文(精选3篇)》,希望对大家有所帮助。摘要[目的]建立切花红掌组织培养快繁体系。[方法]选用切花红掌品种“佛莱”为试材,研究不同外植体、激素对其组织培养诱导、分化和生根的影响。

第一篇:繁殖管理论文范文

红花玉兰快速繁殖的初步研究

摘要:以木兰科木兰属新种红花玉兰为材料,研究了不同培养基和激素配比对不同外植体愈伤组织诱导的影响。筛选结果表明:MS为诱导愈伤组织的最适培养基;休眠芽的成活率高,玻璃化率低,为愈伤组织的最佳外植体;诱导休眠芽产生愈伤组织的最佳培养基为MS +0.5 mg/L BAP(苄氨基嘌呤)+ 0.5 mg/L NAA(α-萘乙酸)。

关键词:红花玉兰;愈伤组织;诱导;培养基

红花玉兰(Magnolia wufengensis)是2006年发表的木兰科木兰属新种[1],又称辛夷、木笔、木兰,其花瓣比一般玉兰花瓣多,花冠硕大,花色艳丽,极具观赏价值,是园林绿化的优良观花树种,具有很高的经济价值[2]。目前,红花玉兰常用的繁殖方法为种子繁殖和嫁接繁殖,两种方法的育苗期长,管理要求严格,速度较慢,不能满足大规模生产和推广。因此,采用离体培养技术进行快速繁殖具有重要的理论和实践意义[3,4]。本研究通过组织培养技术建立红花玉兰离体培养和植株再生体系,旨在为红花玉兰的快速繁殖提供理论依据。

1材料与方法

1.1植物材料及前处理

休眠芽、长有两片幼叶的幼芽和成熟叶片均采自青岛农业大学校园内的红花玉兰树,用自来水冲洗10 min后,再用无菌水冲洗3次,然后放入75%的酒精中漂洗30 min,用无菌水冲洗3次后,再用0.1%HgCl2浸泡(休眠芽浸泡15 min,幼芽和叶片浸泡6 min),最后用无菌水冲洗3次。

1.2试验方法

1.2.1不同培养基对休眠芽愈伤组织诱导的影响以MS、B5为基本培养基,添加不同浓度的细胞分裂素(BAP)和生长素(NAA)[5,6],每种激素有3个浓度水平,两种基本培养基和不同浓度的两种激素两两组合,得到18种不同组合的培养基,如表1所示。

1.2.2不同培养基对幼芽和叶片愈伤组织诱导的影响以MS、N6为基本培养基,设置4个组合进行对比试验。组合1:MS + 2.0 mg/L BAP +0.2 mg/L NAA;组合2:MS + 1.0 mg/L BAP + 0.2 mg/L NAA;组合3:MS + 1.5 mg/L BAP +0.1 mg/L NAA;组合4:N6 + 2.0 mg/L BAP +0.2 mg/L NAA。2结果与分析

2.1不同培养基对休眠芽愈伤组织诱导的影响

将红花玉兰休眠芽接种到含不同激素配比的MS和B5培养基中,30 d时的统计结果(表2)表明,红花玉兰休眠芽在组合2和组合15上的诱导率和生长量最高,分别为100%和 87.5%,但组合15的玻璃化率较高,因此,组合2即MS+0.5 mg/L BAP+0.05 mg/L NAA为最佳培养基。

作者:郑荣生 郑冉

第二篇:切花红掌组培繁殖技术研究

摘要 [目的]建立切花红掌组织培养快繁体系。[方法]选用切花红掌品种“佛莱”为试材,研究不同外植体、激素对其组织培养诱导、分化和生根的影响。[结果]适宜红掌“佛莱”建立无菌系的外植体为4月10日的顶芽组织;初代诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L +NAA 0.3 mg/L;继代培养基为MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.3 mg/L,增殖系数达19.4倍;生根培养基为1/2MS +IBA 0.5 mg/L,生根率100%。[结论] 该研究建立的红掌“佛莱”组织培养快繁体系可为切花红掌工厂化生产提供技术参考。

关键词 红掌;组织培养;外植体;顶芽

doi:10.3969/j.issn.0517-6611.2021.11.034

开放科学(资源服务)标识码(OSID):

Study on in vitro Propagation of Anthurium andraeanum ‘Floris’

SHU Xiao-chun1, ZHANG Bin2, LU Bo3 et al

(1. Institute of Botany, Jiangsu Province and Chinese Academy of Sciences, Nanjing, Jiangsu 210014; 2. Patent Exa mination Collaboration (Beijing) Center of the Patent Office, CNIPA, Beijing 100160; 3.NAN JING LI DAO Modern Agriculture Co., Ltd., Nanjing, Jiangsu 210043)

Key words Anthurium andraeanum;Tissue culture;Explant;Terminal bud

紅掌(Anthurium andraeanum),又名花烛、安祖花、火鹤花等,天南星科花烛属多年生草本植物,原产于南美,喜温暖湿润气候,因花型独特,佛焰苞鲜艳亮丽,色彩丰富,花期长,叶形别致,观叶观花俱佳,已成为仅次于热带兰的热带花卉种类,在我国也比较流行[1-2]。近几年,荷兰AVO公司推出的切花红掌系列新品种因其花大色艳,尤其受到欢迎,市场供不应求,成为华北、华东地区重要的设施栽培切花花卉。该类品种多为国外引进,种苗数量有限,大面积推广应用受到限制。红掌不易结实,一般采用分株繁殖[3],但其肉质根系生长缓慢、分蘖较少,繁殖率极低,用分株繁殖难以扩大生产,故常规繁殖法难以满足市场需求,而组织培养被认为是园艺商品生产中快速繁殖的理想途径。因此,市场推广应用亟需组培快繁技术体系的建立。

目前,有关于红掌种苗繁殖已有不少报道,其中亦有组培繁殖技术方面的研究[4-7],然而,肖三元等[8-9]研究发现,由于植物不同品种间不同外植体的脱分化能力存在一定差异,以往的研究方法不适用于“佛莱”(Floris)等新品种的繁殖。笔者在前人研究[10]的基础上,采用愈伤途径建立红掌“佛莱”再生体系方法,对切花红掌新品种不同外植体、不同激素配方进行了摸索,以期为切花红掌新品种的规模化繁殖提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试材料为红掌品种“佛莱”开花期植株,种植于南京郦岛现代农业发展有限公司温室内,塑料盆栽培,基质为进口泥炭,参照文献[11]的技术标准进行栽培管理。

1.2 试验方法

1.2.1 外植体的筛选。分别在4月10日、5月10日、6月10日和7月10日4个时间点,选取生长健壮、无病虫害的红掌“佛莱”植株,采集新生叶片(未完全展叶)、叶柄和新芽,进行消毒处理和初代诱导。

消毒方法:采集外植体,用清水冲洗干净,然后用洗涤剂漂洗1次,摇床上振荡15~20 min。流水冲洗20~30 min后,于无菌操作台上用75%乙醇消毒10~20 s,立即倒入0.1%HgCl2消毒12 min,最后用无菌水洗涤4次,每次振荡3~5 min。

初代诱导条件:将消毒处理的外植体材料切除两端或周围受伤部分,接种于MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L培养基上进行初代诱导。光照条件3 000 lx,培养基添加蔗糖30 g/L、琼脂7.5 g/L。

每处理接种外植体50段/块,重复3次。接种35 d内每天统计外植体的污染数、愈伤发生率,观察外植体状态;接种60 d后,统计愈伤分化情况。

1.2.2 初代诱导培养基的筛选。

以MS培养基为基础培养基,以顶芽为外植体,添加9种不同组合的外源激素(表1),接种后观察外源激素对初代诱导的影响,包括愈伤组织形成及状态、分化情况。于30 d后统计诱导率,60 d后统计分化率。每处理接种50个外植体,3次重复。

1.2.3 继代培养基的筛选。

以初代诱导培养基为对照(CK),调整6-BA浓度,比较继代增殖过程中丛生芽状态和增殖倍数。6-BA分别选择0.8、0.6和0.4 mg/L 3个水平,分别为B1、B2、B3 3个处理,NAA浓度保持不变,均为0.3 mg/L。

1.2.4 生根培养基的筛选。

比较MS+IBA 1.0 mg/L、MS+IBA 0.5 mg/L、1/2MS+IBA 1.0 mg/L和1/2MS+IBA 0.5 mg/L 4种生根培养基对“佛莱”组培苗生根效果的影响。接种30 d后,统计生根时间、生根状态、根数和根长等指标。每处理50株,3次重复。

2 结果与分析

2.1 外植体的选择

在4个不同接种时间,对红掌“佛莱”组织培养初代受污染情况和愈伤诱导情况进行研究,结果见表2。由表2可知,不同时间接种的初代污染率不同,其中7月10日接种3种外植体的平均污染率77.33%,与其他接种时间的污染率差异并不大。可见,接种时间早,污染率相对较低,这可能与植物材料组织的成熟程度相关,一般而言材料越成熟,组织内的共生菌越多,消毒越困难。这与以往报道的其他植物研究结果相同,如金线莲和矾根外植体取样时间越早污染率越低[12-13]。4个接种时间下的污染率差异不大的主要原因可能是该试验材料采自溫室,为保障切花产品的供应,通过人工环境的调节,植株在不同月份成熟程度较为一致。

不同外植体对红掌“佛莱”组织培养初代诱导的影响差异显著,从愈伤状态和诱导情况可以看出,不同接种时间的顶芽外植体诱导愈伤均优于叶片和叶柄,诱导率较高,4月10、5月10、6月10、7月10日分别为30.5%、30.0%、25.0%、25.0%。顶芽为多种花卉、蔬菜植物组织培养繁殖过程中常用的外植体[14-16],易产生愈伤组织和脱分化出不定芽。

2.2 不同外源激素对愈伤诱导的影响

由表3可知,不同处理间愈伤诱导率和分化率均差异显著。从植物生长促进剂NAA和2,4-D的比较效果看,2,4-D易诱导愈伤但愈伤分化情况不理想,合适比例的6-BA和NAA可提高愈伤诱导率,但2种激素配比不合理可能会导致愈伤难以分化或者难以诱导外植体产生愈伤组织。10∶3浓度比的6-BA和NAA(处理A2)是最佳激素组合,愈伤诱导率最高,达68.67%,分化率达100%,每块愈伤均长出10~20个不定芽。

2.3 不同比例6-BA与NAA对继代苗增殖生长的影响

由表4可知,保持NAA浓度不变,适当降低6-BA浓度,从而降低细胞分裂素与生长素的比例,可有效促进继代苗的增殖生长,防止基部愈伤玻璃化。但6-BA浓度不宜过低,随着浓度下降,继代增殖率也逐渐降低。因此,最适比例为6-BA 0.8 mg/L+NAA 0. 3 mg/L,该配比下组培苗的增殖系数达到19.4倍,且植株状态粗壮,叶片深绿,无玻璃状。

2.4 不同培养基对生根效果的影响

由表5可知,4种培养基下组培苗全部生根,生根率达100%,但基础培养基和IBA浓度水平均对“红掌”组培苗生根有影响,1/2MS培养基优于MS培养基,生根所需时间短,根系短而粗壮、数量多。低浓度IBA优于高浓度水平,说明红掌组培苗生根不需要过多外源激素。因此,最佳培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L,生根率达100%,根长达7.31 cm,根数6.8条,粗壮,生根所需时间短,仅10.7 d。

3 结论

(1)该研究结果表明,建立红掌“佛莱”组织培养快繁体系,应选择顶芽作为外植体,4—7月均可取样建立无菌系。合适配比的6-BA和NAA激素组合,愈伤诱导率高,分比率较高。试验结果表明,最佳初代诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,诱导率68.67%、分化率为100%,每块愈伤均长出10~20个数量不等的不定芽。

(2)不同激素配比对红掌不定芽的增殖具有一定影响。随着6-BA浓度的降低,芽的分化增加,繁殖系数提高。MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.3 mg/L的培养基,可使繁殖系数达到19.4倍,且生长状态较好。

(3)生长素IBA对促进红掌组培苗的生根起着重要作用,在1/2MS基础培养基中添加0.5 mg/L IBA,可有效促进红掌“佛莱”的生根和壮苗,生根率达100%。

(4)该试验筛选出适用于红掌“佛莱”品种的组培快繁条件,由于切花红掌品种繁多,品种间初代诱导培养基研究成果存在一定差异,在进一步研究中将针对不同新优品种进行初代诱导培养基的定向研究,优化红掌工厂化生产的理论体系。

参考文献

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中国花卉协会.2018中国花卉产业发展报告[M].北京:中国林业出版社,2020.

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[16] 秦新惠,崔兴林,伊万伟.地被菊组培快繁技术[J].农业科技通讯,2014(3):257-258.

作者:束晓春 张彬 陆波 王忠

第三篇:西伯利亚鲟批量人工繁殖报告

摘 要:2012年,花垣县北欧玛鲟鱼养殖有限公司利用从法国卡维亚公司引进的F4代西伯利亚鲟(Acipenser baeri)活体胚胎繁育鱼苗,经过6年养殖培育出可以进行繁殖的亲鱼,并于2018年开始连续3年进行人工繁殖取得成功,孵化出F5代鱼苗。本文着重介绍了从亲鱼人工催产、活体取卵及鱼苗孵化的过程,对亲鱼产卵量、好卵量、出苗量进行了记录,并分析了怀卵率、好卵率、出苗率之间以及与亲鱼体重之间的相关性,以期加快推进产业化应用,实现引进西伯利亚鲟的本土化繁育及商品生产。

关键词:西伯利亚鲟;人工繁殖;怀卵率;好卵率;出苗率

自20世纪末到21世纪初,国内很多渔业企事业单位陆续从德国、意大利、匈牙利、法国引进西伯利亚鲟(Acipenser baeri)鱼苗或者活体胚胎孵化鱼苗,进行鱼种培育,开展商品鱼养殖[1]。2010年前后开始有企业选留西伯利亚鲟后备亲鱼。北京北欧玛生物科技有限公司是专门从事法国产西伯利亚鲟鱼苗及活体胚胎引进的企业,1999年至2006年一直引进法国产西伯利亚鲟鱼苗及活体胚胎,孵出鱼苗用全人工颗粒饵料开口后培育鱼种,提供给国内众多鲟鳇养殖企业进行商品鱼生产。随着企业的不断发展,北京北欧玛生物科技有限公司和法国卡维亚公司合资建立花垣县北欧玛鲟鱼养殖有限公司。花垣县北欧玛鲟鱼养殖有限公司是从事西伯利亚鲟水产养殖、技术开发和推广的专业公司,是国内最早以欧洲技术标准从事大规模西伯利亚鲟养殖的公司。花垣县北欧玛鲟鱼养殖有限公司从2012年起,利用陆续引进的法国卡维亚公司第四代西伯利亚鲟活体胚胎孵化鱼苗,经过6年养殖培育出可以进行繁殖和生产鱼子酱的亲鱼,于2018年~2020年连续三年进行人工繁殖,成功孵化出第五代鱼苗,实现了引进西伯利亚鲟的本土化繁育及商品鱼生产。作者通过总结2018年、2019年、2020年批量进行西伯利亚鲟人工繁殖工作,以期推进其产业化发展。

1 材料与方法

1.1 材料

亲鱼为花垣县北欧玛鲟鱼養殖有限公司利用法国卡维亚公司第四代西伯利亚鲟繁殖的活体胚胎,孵化出鱼苗进行培育,在1+龄(1.45±0.05kg/尾)时利用B超技术进行早期性别鉴别,经过选育并进行培育。培育过程中全程使用进口颗粒饵料,投饵率0.1%~0.3%,6+龄达到性成熟,检测后进行人工催产授精,繁殖孵化出第五代鱼苗[2]。

亲鱼(♀)平均体长(110±20)cm/尾,平均体重(11.5±3.5)kg/尾;亲鱼(♂)平均体长(95±25)cm/尾,平均体重(8.5±1.5)kg/尾。♀:♂为1:0.7,亲鱼无病、无伤,体质健康。2018年3批次10尾♀、7尾♂,2019年4批次14尾♀、10尾♂,2020年6批次25尾♀、18尾♂。

催情药物使用促黄体素释放激素(A2)和地欧酮(DOM),混合使用,亲鱼(♀)剂量4mg/kg(2~3次),亲鱼(♂)剂量减半(1次)[3]。

1.2 时间

2018年~2020年,每年1~3月进行人工繁殖,平均每7d~10d进行一批次人工繁殖。

1.3 方法

亲鱼培育及人工繁殖用水为花垣县水源地的兄弟河水库水,符合GB 11607 渔业水质标准, pH7.4,溶解氧(7.5±0.5)mg/L[4]。

在人工繁殖前,自然水温降至15℃开始,对亲鱼采取降温措施,按照1℃/d速度把繁殖用亲鱼池水温降至6℃,维持30d后,再以0.5℃/d速度升至12℃即着手催情人工繁殖,升降温有利于刺激鱼卵发育。

亲鱼降温前后均经过B超检查卵发育的大小,再使用专用工具微创打孔,通过取卵器人工检查鱼卵发育情况;检查完毕微创打孔处稍加消毒抹上凡士林油,当天即可愈合。

人工催情后待鱼卵呈游离状态采取胸部微创开口(与胸鳍平行横切,刀口宽5cm),使用气泵打气方式取卵,气泵气压为0.5Pa~1.0Pa,空气流量为2L/min~3L/min。产卵后使用B超检查,体内几乎没有剩余鱼卵,缝合切口消毒放回暂养池进行产后恢复,10d~15d后检查,胸腔微创切口基本愈合。180d后B超检测,亲鱼(♀)性腺发育良好,大多数亲鱼(♀)已经怀卵。

取出的鱼卵均处于分离状态,无脂包卵和卵巢组织,按尾称重测样计数,然后进行人工授精、滑石粉脱黏,每尾亲鱼产的卵随机取样统计好卵率,人工繁殖的活体胚胎使用孵化器进行孵化。孵化过程中无水霉发生。

1.4 结果

各批次人工孵化用亲鱼情况见表1;产卵量、好卵量、出苗量情况见表2;以此统计怀卵率、好卵率、出苗率见表3。

2 分析

2019年4批次14尾♀、10尾♂,2020年6批次25尾♀、18尾♂。

2.1 2018年3批次10尾♀、7尾♂

怀卵率14.98%~15.02%,平均15.00%;好卵率66.00%~68.10%,平均66.76%;出苗率76.04%~92.19%,平均83.91%。怀卵率、好卵率、出苗率之间以及与亲鱼体重之间没有相关性。

2.2 2019年4批次14尾♀、10尾♂

怀卵率15.49%~15.52%,平均15.51%;好卵率67.76%~69.51%,平均68.14%;出苗率77.74~82.35%,平均79.53%。怀卵率、好卵率、出苗率之间以及与亲鱼体重之间没有相关性。

2.3 2020年6批次25尾♀、18尾♂

怀卵率15.00%~15.50%,平均15.23%;好卵率66.00%~71.00%,平均68.11%;出苗率76.23%~87.16%,平均80.79%。怀卵率、好卵率、出苗率之间以及与亲鱼体重之间没有相关性。

3 讨论

3.1 人工繁殖

2018年~2020年,利用2012年开始引进的法国西伯利亚鲟,经过6年使用进口颗粒饵料养殖培育,已经完全适应花垣县北欧玛鲟鱼养殖有限公司生产基地水域环境,从统计的怀卵率(成熟系数)情况看,平均15.00%~15.51%,高于法国及国内(10.00%~12.00%)。在投饵率0.1%~0.3%(大大低于国内的1%~3%)养殖生产模式下,性腺发育正常,没有出现营养不良及脂包卵,并且在人工干预情况下繁殖成功。在推进西伯利亚鲟产业化发展过程中,要注意有计划引进德国、意大利、匈牙利养殖的西伯利亚鲟,特别是俄罗斯西伯利亚鲟原种,防止种质退化。

3.2 亲鱼成熟度及鱼卵质量鉴定

2018年~2020年,花垣县北欧玛鲟鱼养殖有限公司人工繁殖所用亲鱼(♀)均采取B超结合专用工具微创打孔鉴定西伯利亚鲟雌性亲鱼成熟度及鱼卵质量。该技术具有鉴定准确性高、对雌性亲本损伤小、损伤恢复快的优点,3年里没有因此技术造成亲鱼染病死亡,克服了侧切取卵等方法容易对亲本损伤大、伤口感染率高的缺陷。

3.3 充气式采卵

采取胸腔微创开口(5cm),使用气泵打气方式取卵,产卵后缝合切口消毒放回暂养池进行产后恢复。经过10d~15d检查,胸腔微创切口基本愈合。180d后B超检测,亲鱼(♀)性腺发育良好,540d后B超检测49尾亲鱼(♀)中有45尾已经出现卵基细胞,重复使用率超过90%,避免了剖腹产刀口(一般从胸腔至生殖孔前)缝合后恢复时间长、刀口感染率高的问题。同时,由于所取出的鱼卵无脂包卵和卵巢组织,人工授精脱黏后在孵化器孵化过程中均未发生水霉病。

参考文献:

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[6]张耀武,陈万光,乔明超,等. 西伯利亚鲟鱼的人工繁殖试验总结[J]. 河南水产,2017(2):7-8+11.

作者简介:刘成刚(1982.3-),男,花垣县鲟鱼养殖有限公司基地经理、技术员。研究方向:鲟鱼养殖。

通讯作者:康萌(1964.4-),男,黑龙江省水产技术推广总站副站长、研究员。研究方向:淡水增养殖。

作者:刘成刚 吴含含 康萌 张旭彬 孔令杰 李妍 龙江陵 吴琼花

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